Спектральная лазерная сканирующая Конфокальная микроскопия в биологических исследованиях. Феофанов А.В.

А. В. ФЕОФАНОВ

Институт биоорганической химии им. академиков М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, Москва

 

Оптическая микроскопия уже более 300 лет находит все более разно­об­разное и широкое применение. Анализ окрашенных срезов тканей и клеток в проходящем белом свете – наиболее простое, но весьма информативное применение оптической микроскопии и сегодня остается неотъемлемой частью клинических и медико-лабораторных исследований. Данный подход основан на использовании различий в интенсивности и цвете естественной или искусственной окраски определенных веществ в клетках и тканях в комбинации с анализом морфоло­гических признаков. Разработка оптических систем для реали­зации методов темного поля, фазового и дифференциального интерферен­ционного контраста открыла исследователям возмож­ность наблюдения и исследования микроструктур в неокрашенных и слабоконтрастных биологических объектах, таких как живые клет­ки. Создание флуоресцентных микроскопов позволило на фоне огром­ного числа разнообразных молекул избирательно наблюдать флуорес­цирующие, и стимулировало развитие новых методов для изу­чения структуры и функции клеток. Изобретение конфокальной системы фильтрации сигнала обес­пе­чило измерение флуоресцентных сигналов с трёхмерным субмик­ронным разрешением и существенно расширило возможности нераз­ру­шающего анализа прозрачных образцов. Еще два изобретения 20 века – лазер и компьютер – послужили мощным стимулом для бурного развития новых методов лазерной флуоресцентной микроскопии: лазерной сканирующей конфокальной микроскопии (ЛСКМ), микроспектроскопии, многофотонной микроскопии [1], микрос­копии на основе измерения времени жизни флуоресценции [2], микроскопии с применением эффекта полного внутреннего отражения и 4Pi микроскопии [3]. Несмотря на значительное ус­лож­нение техники измерений и обработки результатов, новые методы получили широкое распространение. Развитие генной инже­нерии, протеомики, биотехнологии, современной фармацевтики и биоме­дицины способствовало быстрому внедрению новых методовоптической микроскопии. В настоящем обзоре рассмотрен метод ЛСКМ с акцентом на те воз­можности, которые открывает исследователям его применение в комбинации со спектральный анализом. 

С полным текстом можно ознакомиться здесь

 

30 июля 2014
|
Разместил: Confocal club
Яндекс.Метрика