Новая микроскопия позволила увидеть движение белков в живой клетке

Группа физиков и биологов из США и Китая, в соавторстве с Нобелевским лауреатом Эриком Бетцигом, разработала новый вид оптической микроскопии, превышающей предел дифракции. Новая техника позволяет без вреда для клетки получать видеоролики движения белков в ней, успевая получать несколько кадров за одну секунду. Изображение, полученное новым методом, было использовано при оформлении обложки Science, статья, посвященная микроскопии, опубликована в сегодняшнем выпуске журнала.

Авторы модифицировали метод микроскопии, использующий структурированное освещение — SIM. В оригинальном методе для освещения образца используется интерференционная картина, создаваемая с помощью лазерного луча и дифракционной решетки. Внутри образца при этом находятся различные флуорофоры, которые способны светиться под действием излучения. В результате наложения и обработки снимков, сделанных при различных углах поворота решетки и смещениях, исследователи получают изображение с разрешением до 100 нанометров — вдвое лучше дифракционного предела. Ключевым здесь является анализ муара в «полосатых» фотографиях.

В новой работе исследователи улучшили метод благодаря двум независимым нововведениям. Во-первых, благодаря использованию объектива с ультрабольшой числовой апертурой — это позволило добиться разрешения в 84 нанометра и скорости съемки два кадра в секунду. Во-вторых — используя нелинейную зависимость интенсивности свечения люминофора от интенсивности падающего на него излучения. С помощью фотопереключаемого зеленого белка FP Skylan-NS авторы добились разрешения деталей размером 45 нанометров. Для сравнения, диаметр микротрубочек, являющихся частью цитоскелета клетки, составляет 25 нанометров.

Продолжение в источнике.  

Смотрите также:

 

 

 

02 сентября 2015
|
Автор: Confocal club
Яндекс.Метрика